課題番号 ：S-19-CT-0117
利用形態 ：機器利用
利用課題名（日本語） ：ビスフェノールＡによるカルシウムシグナル伝達阻害の分子基盤
Program Title (English) ：Molecular basis of inhabitation of calcium signal transduction
by Bisphenol A
利用者名（日本語） ：村山幸一
Username (English) ：K. Murayama
所属名（日本語） ：北海道教育大学　旭川校　理科教育専攻
Affiliation (English) ：Hokkaido University of Education at Asahikawa Campus

１．概要（Summary ）
　内分泌撹乱化学物質ビスフェノール A（BPA） がカルシウムシグナル伝達に作用し統合失調症に至る分子要因を調べている。本年は，カルシウムが結合していないアポ型カルモデュリン（Apo CaM）に，BPA結合が及ぼす影響と相互作用部位を調べた。

２．実験（Experimental）
　Apo CaMにBPAを結合させた/させない試料を用いた。円二色性分光（CD）測定装置（J-820，日本分光，公立千歳科技大）を使用し，200-250 nmで測定した。
　また，BPA結合によるApo CaMのアミノ酸部位の相互作用部位を同定するため，Bruker AVANCE600分光計（Bruker BioSpin社，　岐阜大）を用い1H-15N HSQCスペクトルを測定した。

３．結果と考察（Results and Discussion）
　Apo CaMにBPAを結合させた場合，Apo CaMに比べてαヘリックス由来のCDスペクトルの下向きピークの伸長が観測された（図１）。これはBPAとの相互作用により，Apo CaMの「閉じた」コンホメーションがわずかに拡大することを意味する。
　1H-15N HSQC結果から，Apo CaMの6か所のアミノ酸部位（カルシウム結合部位とヒンジ領域）がBPAと相互作用していることが明らかになった（図２中の赤部分）。

図１：Apo CaMのCDスペクトル（赤：BPA結合なし，青：BPA結合あり）

図２：1H-15N HSQC結果から得られたBPAのApo CaMへの相互作用部位

４．その他・特記事項（Others）
（謝辞）NMR測定で協力頂きました，鎌足雄司 博士，と大野敏 博士（岐阜大学）に感謝いたします。

５．論文・学会発表（Publication/Presentation）
村山幸市，日本化学会北海道支部2019年夏季研究発表会（苫小牧高専），2019年7月12日

６．関連特許（Patent）
なし