課題番号 ：S-13-JI-0038
利用形態 ：機器利用
利用課題名（日本語） ：生体試料のイメージング質量分析における前処理法の開発
Program Title (English) ：The new preprocessing method in imaging mass spectroscopy of biological sample
利用者名（日本語） ：小澤智行1), 濵田聡志1)
Username (English) ：T. Ozawa1), S. Hamada1)
所属名（日本語） ：1)日産化学工業株式会社
Affiliation (English) ：1) Nissan Chemical Industries, Co., Ltd.

１．概要（Summary ）
マトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析法(MALDI-MS)を用いたイメージング質量分析(IMS)は医学，薬学分野において広く用いられている．しかし，生体切片中に多く含まれるPhosphatidylchorine (PC)が強くイオン化されることで，イオンサプレッションが起こる問題がある．白金スパッタリングを利用した表面支援レーザー脱離イオン化法(Pt-SALDI)1は，MALDIと異なるイオン化特性を持つため，MALDIでイオン化が困難な化合物を検出できることが期待される．本研究では，ラット脳切片を用いてMALDI-IMSとPt-SALDI-IMSのイオン化特性を評価した．さらに，有機マトリックスを用いたMALDIと無機マトリックスを用いたPt-SALDIを組み合わせたイオン化法(matrix-enhanced Pt-SALDI：ME-Pt-SALDI)の有効性を評価した．

２．実験（Experimental）
使用装置：質量分析装置(FT-ICR-MS)
厚さ10 μmのラット脳切片を試料として用いた．MALDIの試料は，自動噴霧器(ImagePrep, Bruker Daltonics Inc.)を用いてDHB溶液(30 mg/mL )を2 mL噴霧して調製した．Pt-SALDIの試料は，スパッタリング装置を用いてArガス圧1 Paで膜厚3 nmのPt薄膜を試料切片上に作成して調製した．ME-Pt-SALDIの試料は，MALDIと同様にDHB溶液を噴霧し，Pt-SALDIと同様にPtスパッタリングを行い調製した.

３．結果と考察（Results and Discussion）
MALDIのイメージング結果をFig.1に示す。MALDIでは，PC(36:1)などが主に検出され，その多くが脳全体に分布していた（Fig. 1(a)）．一方，Pt-SALDIではPCが検出されなかったが，diacylglycerolのDAG(36:2)などが主に検出され，それぞれラット脳切片中で特異的な分布が観測された（Fig. 1(b)）．また，ME-Pt-SALDIのイメージングでは，PCとDAGが同時に検出された（Fig. 2）．更に，PCとDAGのイオン強度は，それぞれMALDI，及びPt-SALDI共に同程度であった．この結果より，ME-Pt-SALDIはMALDIとPt-SALDIの両方のイオン化特性を併せ持つことが示唆された．

４．その他・特記事項（Others）
1) H. Kawasaki et al., Rapid Commun. Mass. Spectrom.., 26, 1849-1858 (2012)
（JAIST　大坂一生氏の技術指導による）

５．論文・学会発表（Publication/Presentation）
(1) T. Ozawa et al, Journal of Mass Spectrometry., 50, 1264–1269(2015)
(2) S. Hamada et al, 第63回日本質量分析討論会, 平成27年6月17日

６．関連特許（Patent）
なし