課題番号                ：S-18-NM-0010

利用形態                ：機器利用

利用課題名（日本語）    ：NK細胞誘導時におけるヒト末梢血単核球とHFWT細胞の相互作用解析

Program Title (English) ：Analysis of interaction between human peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) and HFWT cells in NK cell induction phase.

利用者名（日本語）      ：上前洋二

Username (English)     ：Youji Uemae

所属名（日本語）        ：セルメディシン株式会社

Affiliation (English)  ：Cell-Medicine.Inc.

１．概要（Summary ）

ヒト末梢血単核球(PBMC)とHFWT細胞の共培養により、効率的にNK細胞を増殖することが可能である。しかし、その分子メカニズムは不明な点が多く、より効率的なNK細胞誘導法の開発のため、その分子メカニズムについて解析を行う。

２．実験（Experimental）

【利用した主な装置】

・セルソーター装置(SH800)

【実験方法】

PBMCとHFWTを共培養する際に、NK細胞の活性化に関与する分子を抗体で阻害し、NK細胞への増殖に影響が出るかを検討した。使用した抗体は、過去の文献で阻害目的で使用されている抗体で、抗NKG2D抗体(クローン：1D11)、抗CD94抗体(クローン:DX22)、抗HLA-A,B,C抗体(クローン:W6/32)、抗HLA-E抗体(クローン:3D12)を使用した。その後、増殖してきた細胞を抗CD3抗体、抗CD56抗体、抗CD4抗体、抗CD8抗体で染色し、セルソーター(SH800)で解析した。

３．結果と考察（Results and Discussion）

各抗体処理に関わらずNK細胞の誘導は阻害されず、逆に増加傾向が見られた。

再現性の確認が必要なものの、これまで報告されている既知の分子間相互作用にとらわれず、網羅的解析も試みたいと思う。

４．その他・特記事項（Others）

なし。

５．論文・学会発表（Publication/Presentation）

なし。

６．関連特許（Patent）

なし。