課題番号                ：S-18-NU-0031

利用形態                ：共同研究

利用課題名（日本語）　  ：ナノバイオ分子合成・超解像解析評価システムによる移植幹細胞のマウス肝臓内動

態解析

Program Title (English) ：In vivo visualization of transplanted stem cells in a mouse liver using

nanobio-molecule synthesis and super resolution analysis system.

利用者名（日本語）      ：石川哲也

Username (English)     ：T. Ishikawa

所属名（日本語）        ：名古屋大学大学院医学系研究科

Affiliation (English)  ：Graduate School of Medicine, Nagoya University

１．概要（Summary ）

再生医療において移植細胞の生体内動態・局在の診断が可能なイメージング技術の確立は、治療の安全性を担保し、治療効果の向上に寄与する。本機器利用においては、ヒトiPS細胞より分化誘導した肝様細胞において、量子ドット（QD）によるラベル化手法の最適化及びマウスへの移植後のin vivoイメージングを試みた。

２．実験（Experimental）

iPS細胞由来肝様細胞において、QDをラベル化剤として用い、in vivoイメージングに適したラベル化効率、蛍光強度（MFI）の確保と分化後の細胞機能維持が可能なラベル化条件（QD濃度、ラベル化時間、タイミング）を検討した。ラベル化細胞は門脈経由でマウスに移植し、in vivo イメージングシステム(PerkinnElmer社製 INIS Lumina K ver4.4)、二光子励起顕微鏡(ナノバイオ分子合成・超解像解析評価システム ニコン製多光子共焦点レーザー顕微鏡A1RMP)を用いて移植後の体内動態、局在を観察した。

３．結果と考察（Results and Discussion）

ラベル化効率、MFI、細胞機能についての検討より、QD濃度、ラベル化時間、ラベル化のタイミング等の最適化を進めた。好条件下においてラベル化したiPS細胞由来肝様細胞は、マウスへの移植後のin vivo、ex vivoイメージングにおいて、そのほとんどが長時間肝臓に留まり、肝類洞内に局在していることが確認できた。

本支援の機器利用を活用することで、QDラベル化肝様細胞がマウスへの移植後の生体内動態・局在の観察に対する有効性の確認を進めることができた。

４．その他・特記事項（Others）

本研究遂行にあたり、ご協力いただいた湯川博特任講師に感謝いたします。

５．論文・学会発表（Publication/Presentation）

なし。

６．関連特許（Patent）

なし。