利用報告書

サイトゾル移行型ドラッグデリバリーを用いた生体治療 (心筋梗塞モデルでの検証)
奥田明子, 田原慎也
新潟大学大学院保健学研究科

課題番号 : S-17-NU-0026
利用形態 : 技術代行
利用課題名(日本語) : サイトゾル移行型ドラッグデリバリーを用いた生体治療
(心筋梗塞モデルでの検証)
Program Title (English) : Biological treatment using cytosolic delivery type drug delivery
(Verification in myocardial infarction model)
利用者名(日本語) : 奥田明子, 田原慎也
Username (English) : A. Okuda, S. Tahara
所属名(日本語) : 新潟大学大学院保健学研究科
Affiliation (English) : Graduate School of Health Sciences, Niigata University

1.概要(Summary )
 我々は、疎水性配列を含む塩基性に富んだサイトゾル移行型の膜透過ペプチド配列を見出した。このサイトゾル移行型膜透過ペプチドは、導入物質とインキュベートするのみで複合体を形成し、化学的な架橋を必要としない。複合体形成時に、凝集体が生じることから細胞・生体実験へ応用する上で、この凝集体に関して、粒径測定のデータが必要不可欠であると考え測定を依頼した。

2.実験(Experimental)
 粒径測定装置(大塚電子 ELSZ-2)を利用した。30 M 導入分子と40 M 膜透過ペプチドとなるように超純水を加え、総量100 Lをマイクロチューブ内で混合した。一時間静置後、調製溶液50 Lに超純水50 Lを加え、15 M 導入分子と20 M 膜透過ペプチドを含む溶液 60 Lを測定セルへ移して粒径測定を行った。

3.結果と考察(Results and Discussion)
 導入分子と膜透過ペプチドを混合してから60分後に、平均 3095.9 nmの粒子を形成していることが分かった(右図)。この結果は、共焦点レーザー顕微鏡で複合体を観察した際に検出された凝集体の大きさとほぼ一致した。今後、この凝集体が導入分子の細胞内への移行にどのように関与しているのか、詳細な検討を行いたい。また、このような分子が持つゼータ電位を測定し、細胞表面との相互作用を考える上での参考データとしたい。

4.その他・特記事項(Others)
 本実験をおこなう際に御助言を頂きました分子・物質合成プラットフォームの坂口佳充特任教授と測定を行って頂きました分子・物質合成プラットフォームの伊藤始氏に感謝致します。
 本実験はJSPS科研費 17K08947の助成を受けた。

5.論文・学会発表(Publication/Presentation)
日本薬学会第138年会(金沢)2018年3月

6.関連特許(Patent)
なし

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