利用報告書

新規分子認識素の特性評価
鳩貝泰1), 三上あかね1)
1) 東京工科大学医療保健学部臨床検査学科

課題番号 :S-19-NM-0057
利用形態 :機器利用
利用課題名(日本語) :新規分子認識素の特性評価
Program Title (English) :Characterization of a novel molecular recognition molecule
利用者名(日本語) :鳩貝泰1), 三上あかね1)
Username (English) :Tai Hatogai1), Akane Sakaguchi-Mikami1)
所属名(日本語) :1) 東京工科大学医療保健学部臨床検査学科
Affiliation (English) :1) Tokyo University of Technology

1.概要(Summary)
臨床診断法開発に有用な新規バイオマーカー認識素子の開発を目的として,単離した新規分子認識素子の標的分子に対する結合能の検討を行った.まず,新規分子認識素子に環境感受性蛍光色素を修飾し,その蛍光特性評価を行った.次に分子認識に伴って起こる構造変化を修飾した環境感受性蛍光色素の蛍光強度変化率に基づき評価し,新規分子認識素子の標的バイオマーカー分子に対する結合能の評価を試みた.

2.実験(Experimental)
【利用した主な装置】
・日立蛍光分光光度計F-7000
【実験方法】
日立蛍光分光光度計F-7000を使用し,蛍光修飾新規分子認識素子の励起及び蛍光極大波長を測定し蛍光特性を評価した.次に,任意濃度のリガンドを蛍光修飾した新規分子認識素子に添加し,蛍光強度を測定し,リガンド結合によって起こる転写調節因子のコンフォメーション変化を蛍光強度の変化率用いて評価し,新規転写調節因子の標的分子特異的結合能を評価した.

3.結果と考察(Results and Discussion)
蛍光修飾新規分子認識分子の蛍光極大波長及び蛍光極大波長はそれぞれ,489 nm, 548 nmであった.次に,蛍光修飾した新規分子認識分子の標的バイオマーカー分子への結合能を検討した.蛍光修飾新規分子認識分子の蛍光強度は,添加する標的分子の濃度依存的に増加した.しかし,標的分子と標的分子アナログに対する蛍光強度変化に顕著な差がみられず,新規分子認識分子の標的分子特異的な結合能は確認されなかった.  
今後、他の蛍光感受性色素の検討,蛍光修飾部位の検討などを行う必要があると考えられた.

4.その他・特記事項(Others)
装置の使用トレーニングを受け、また機器のトラブルに対応していただいた.

5.論文・学会発表(Publication/Presentation)
なし

6.関連特許(Patent)
なし

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